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捕蝇草的组培快繁技术

已阅:1265

吴雪松,吴雪枫,甘 青,周 琴,龚 伟

(吉安市林业科学研究所,江西吉安  农业管理论文发表

摘要:用捕蝇草的种子经消毒处理后接种到MS+6-BA 0.1 mg/L的培养基中,诱导出愈伤组织,而后用1/2MS培养基从愈伤中诱导出芽团。继代时把芽团分成具23个芽的小芽团交替使用1/2MS+2ip 0.03 mg/L+IAA 0.01 mg/L1/8MS+2ip 0.03 mg/L+IAA 0.01 mg/L扩繁,增殖倍数3.05.0倍,经过一段时间的培养后切取达到生根标准的单株接到1/8MS+IAA 0.03 mg/L+C 200 mg/L培养基中,20天后生根率达100%。炼苗20天左右移栽,成活率达80%85%以上。

关键词:捕蝇草;组织培养;交替使用;1/2MS1/8MS培养基

引言

捕蝇草(Dionaea muscipula)又名苍蝇夹,是食虫植物茅膏菜科(Droseraceae)内的捕蝇草属,为多年生草本。植株秀丽别致,它能散发出对昆虫有诱惑性的芳香,可引诱昆虫前来并捕抓,而后由叶面的紫红色腺体分泌消化液将昆虫分解并吸收,是一种很有趣的小型食虫植物。在欧美常用来盆栽观赏[1]。由于捕蝇草有一对可开合的捕虫叶片,具有十分明显的捕虫特征,且叶色鲜红,是优良的珍奇观赏花卉及学校生物课的植物活教材,因此十分受欢迎被广泛栽培,目前美国、荷兰等国均已产业化生产供应市场[2]

捕蝇草常规用叶片扦插,子芽分植等无性方法繁殖。由于叶片扦插成活率低,植株萌芽能力较差,满足不了市场的需求,而应用组培技术可以较快获得大量的幼苗。目前,国内有关捕蝇草组织培养研究报道较少[3-5],本文通过试验实践,总结出了一套捕蝇草的实用组培快繁技术,并在企业形成规模化生产,品质良好,产品出口到荷兰,取得较好的经济效益。

试验材料和方法

    取荷兰来捕蝇草的种子,用自来水清洗干净,后用70%的酒精浸润约0.5 min,无菌水冲洗23次。用0.1%升汞消毒0.51 min,无菌水冲洗35次,滤干水后接种至MS+6-BA 0.1 mg/L的培养基中。约30天后出现愈伤组织,将愈伤组织接种至1/2MS的培养基中,经30天后出现丛状小芽,丛状小芽分切成23个芽/团继代培养。

    以上培养基均含蔗糖3%,卡拉胶0.75%pH5.5,培养温度2224℃,光照1012 h/天,光强1 5002 000 lx

结果与分析

2.1  愈伤组织的诱导

将备好的种子5个一团为1个增殖单位接种到诱导愈伤试验培养基中。共4个处理。基本培养基为MS,每升分别添加细胞分裂素2IP 0.3 mg6-KT 0.3 mg6-BA 0.1 mg6-BA 0.3 mg。根据观察,试验结果如下:捕蝇草种子对三种细胞分裂素均敏感,但KT2ip形成愈伤比率稍低,且KT有少量玻璃化现象。而6-BA又以0.1 mg/L为好,所形成愈伤比例较高且无玻璃化现象,质量好。含6-BA 0.3 mg/L的培养基虽形成愈伤比率高,但其愈伤呈现很高比例的玻璃化,质量不好。因此,愈伤组织诱导以MS添加细胞分裂素6-BA 0.1 mg/L培养基最佳。

2.2  芽的诱导

把愈伤组织分成约0.3 cm大小的块状,分别接入以下诱导芽的试验培养基中,共9个处理。三个处理基本培养基为MS,每升分别添加细胞分裂素02IP 0.05 mg6-KT 0.05 mg。三个处理基本培养基为1/2MS,添加细胞分裂素同上。另三个处理基本培养基为1/8MS,添加细胞分裂素也同上。根据观察,试验结果如下:以MS为基本培养基的愈伤组织都有玻璃化现象,添加了细胞分裂素的更严重。以1/8MS为基本培养基的愈伤组织都有死亡现象,添加了细胞分裂素的还有玻璃化现象。以1/2MS为基本培养基未添加细胞分裂素的愈伤组织正常,诱导的小芽多且生长好,植株挺拔。但添加了细胞分裂素的有玻璃化现象。综上分析,愈伤诱导芽的培养1/2MS基本培养基优于MS1/8MS两种基本培养基,又以1/2MS基本培养基且不添加任何细胞分裂素为最佳。

2.3  芽的增殖

将诱导出的小芽丛分成23个芽/团,转入各增殖试验培养基中,共8个处理。基本培养基四个处理为1/2MS,另四个处理为1/8MS。每升分别添加细胞分裂素2IP 0.01 mg2IP 0.03 mg6-KT 0.01 mg6-BA 0.01 mg和生长素IAA 0.01 mg.40天为一个周期续代一次可产生35个子芽。根据观察:用1/2MS为基本培养基的处理芽团表现叶色绿,子芽多且植株高大粗壮,长势好。用1/8MS为基本培养基的处理芽团表现叶色颜色鲜红,但子芽较少且植株偏矮小,长势较差。细胞分裂素中以添加2ip 0.03为最好,用6-BA6-KT虽然子芽多,但会导致叶片皱缩不舒展且叶片明显缩小,表现不正常。综上分析,1/2MS添加2IP 0.03 mg/LIAA 0.01 mg/L处理培养基用于芽团在增殖扩繁最好,芽多苗大且无皱缩芽,但叶片虽大颜色却偏绿,而客户要求是苗大且叶片颜色鲜红。尝试在续代过程中用两次1/2MS添加2IP 0.03 mg/LIAA 0.01 mg/L的培养基后再用一次1/8MS添加2IP 0.03 mg/LIAA 0.01 mg/L的培养基,达到了很好的效果:苗高大舒展,叶片又呈现鲜艳的红色,客户非常满意。

2.4  根的诱导

    将芽团中H1.2 cm的粗壮单芽挑下,去除边缘黑褐叶片接入四种生根试验培养基中,培养基的基本母液为1/8MS,每升分别添加IAA 0.01IAA 0.03NAA 0.01NAA 0.03和活性碳200 mg。经观察,以每升添加IAA 0.03和活性碳200 mg的培养基为最佳。710天后根就开始萌动,20天后有100%的苗都生出23条长约0.5 cm的根,而且芽苗舒展,叶大色红。

移植

    将已生根的小苗放入荫棚内炼苗1015天,使其适应自然环境后将小苗从培养器皿中取出,洗去培养基移栽入1/3椰糠+2/3泥炭土的基质中,注意保温保湿,小苗很快正常生长,成活率85%以上。

结语

1)在捕蝇草的组织培养中诱导愈伤以MS+6-BA 0.1 mg/L为好。从愈伤中诱导出芽以1/2MS不添加任何细胞分裂素为最佳。

2)在捕蝇草的继代培养中,为保证生产出高大舒展,叶片又呈现鲜艳红色的苗。采用两种不同基本母液的培养基交替使用,达到了很好的效果。

本文来源:《农业开发与装备》杂志/期刊